從免疫原性及不亂性等方面臨5種抗原進(jìn)行比較，*選擇活化酯法合成的BSA-SM/b作為免疫抗原，通過(guò)雜交瘤技術(shù)獲得1株能不亂分泌抗鏈霉素特異性單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株5C10。通過(guò)實(shí)驗(yàn)比較了5種樣品處理方法，ELISA試劑盒選擇用Careez法處理并4倍稀釋后用于測(cè)定。為探索一種能夠快速有效的檢測(cè)牛奶中鏈霉素殘留的方法，本研究采用單克隆抗體技術(shù)等技術(shù)，合工抗原，制備出抗鏈霉素單克隆抗體，建立了檢測(cè)牛奶中SM殘留的ELISA測(cè)定法，組建成鏈霉素快速檢測(cè)ELISA試劑盒并進(jìn)行了優(yōu)化和實(shí)際應(yīng)用。
作為一種敏捷、快速、特異性強(qiáng)的方法，酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法正逐漸應(yīng)用于藥物的殘留檢測(cè)，海內(nèi)外已經(jīng)建立了多種檢測(cè)牛奶中鏈霉素賤留的理化檢測(cè)方法，固然有些方法比較敏捷、，但因?yàn)榉椒◤?fù)雜、耗時(shí)長(zhǎng)、花費(fèi)大、技術(shù)要求高等原因而不適合大批量樣品的篩選。制備的腹水效價(jià)為1∶1280000，蛋白濃度為26.2mg/ml，與其他抗菌藥物的交叉反應(yīng)率均低于0.1％。尺度曲線的批內(nèi)變異系數(shù)為11.87％，均勻批間變異系數(shù)為8.017％。建立ELISA試劑盒尺度曲線的線性方程為y=1.8061-0.4932x(線性范圍25～2500ng/ml)，其LOD為8.11ng/ml，低于劃定的牛奶中鏈霉素zui低殘留*200ng/ml。然而不規(guī)范用藥會(huì)引起畜禽產(chǎn)品尤其是泌乳動(dòng)物乳汁中的藥物殘留，對(duì)人類的健康構(gòu)成潛伏危害。
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