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大鼠凝溶膠蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒

本試劑僅供研究使用  標(biāo)本：血清或血漿

試驗(yàn)原理：
Gelsolin試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知Gelsolin濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將Gelsolin和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Gelsolin的濃度呈比例關(guān)系。

自備材料
1． 蒸餾水。
2． 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3． 振蕩器及磁力攪拌器等。

大鼠凝溶膠蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒

安全性
1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。
2． 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項(xiàng)
1． 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
2． 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
3． 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6． 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7． 底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8． 加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9． 按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

大鼠凝溶膠蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒

樣品收集、處理及保存方法
1、 血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
5、 保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

操作步驟
1． 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2． 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3． 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。
4． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
5． 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8． 取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9． 在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到的結(jié)果。

大鼠凝溶膠蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒

試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的Gelsolin標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的Gelsolin含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

3、檢測(cè)值范圍：0-240nmol/L

4、敏感度： 0.1 nmol/L
9-Aminoacridine hydrochloride , hydrate 9-氨基吖啶單鹽酸單水合物 [52417-22-8] 25g
7-Aminoactinomycin D 7-氨基放線菌素 [7240-37-1] 1mg
DL-2-Aminoadipic acid DL-2-氨基己二酸 [542-32-5] 50g
4-Aminoindole 4-氨基吲哚 [5192-23-4] 25g
6-Aminoindole 6-氨基吲哚 [5318-27-4] 25g
3-Aminoisonicotinic acid 3-氨基異煙酸 [7579-20-6] 250g
4-Aminoantipyrine 4-氨基安替吡啉 [83-07-8] 100g
p-Aminobenzamide, dihydrochloride 對(duì)氨基苯甲脒二鹽酸鹽 [2498-50-2] 5g
4-Aminobenezenesulfonic acid, anhydrous 對(duì)氨基苯磺酸 [121-57-3] 100g
Bluo-Gal 5-溴-3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷 [97753-82-7] 250mg
Brij-35 聚環(huán)氧乙烯月桂酰醚 [9002-92-0] 250g
4-Aminobenezenesulfonic acid, anhydrous 對(duì)氨基苯磺酸 [121-57-3] 500g
m-Aminobenzoic acid 間氨基苯甲酸 [99-05-8] 50g
p-Aminobenzoic acid 對(duì)氨基苯甲酸 [150-13-0] 50g
p-Aminobenzoic acid 對(duì)氨基苯甲酸 [150-13-0] 250g
o-Aminobenzoic acid methyl ester 鄰氨基苯甲酸甲酯 [134-20-3] 100ml
DL-2-Aminobutyric acid DL-2氨基丁酸 [2835-81-6] 50g
4-Aminobutyric acid γ－氨基丁酸 [56-12-2] 50g
4-Aminobutyric acid γ－氨基丁酸 [56-12-2] 250g
7-Aminocephalosporanic acid 7-氨基頭孢烷酸 [957-68-6] 50g
2-Amino-3-chlorobenzoic acid 2-氨基-3-氯苯甲酸 [6388-47-2] 25g
2-Amino-6-chlorobenzoic acid 2-氨基-6-氯苯甲酸 [2148-56-3] 250g
2-Amino-6-chloropurine 2-氨基-6-氯嘌呤 [10310-21-1] 25g
Olive oil 橄欖油 [8001-25-0] 100ml
Ovalbumin from Egg White 卵清蛋白 [9006-59-1] 25g
Palladium/C catalyst 鈀/碳催化劑 / 5g
2-Amino-6-chloropurine 2-氨基-6-氯嘌呤 [36315 -01-2] 100g
2-（2-Aminoethoxy）ethanol 二甘醇胺 [929-06-6] 500ml
4-（2-Aminoethyl）morpholine N-氨乙基嗎啉 [348-40-3] 25g
Aminoglucose hydrochloride 氨基葡萄糖鹽酸鹽 [66-84-2] 25g
6-Aminohexanoic acid 6-氨基己酸 [60-32-2] 100g
6-Aminohexanoic acid 6-氨基己酸 [60-32-2] 500g
5-Amino-o-hydroxybenzoic acid 5-氨基水楊酸 [89-57-6] 50g
5-Amino-o-hydroxybenzoic acid 5-氨基水楊酸 [89-57-6] 250g
7-Amino-4-methylcoumarin 7-氨基-4-甲基香豆素 [26093-31-2] 1g
7-Amino-4-methylcoumarin 7-氨基-4-甲基香豆素 [26093-31-2] 5g
1-Amino-8-naphthol-3,6-disulfonic acid, monosodium salt , hydrate H酸單鈉鹽 / 100g
1-Amino-2-naphthol-4-sulfonic acid 1-氨基-2-萘酚-4-磺酸 [116-63-2] 100g
D-Biotin D-生物素 [58-85-5] 500mg
D-Biotin D-生物素 [58-85-5] 1g
2-Amino-8-naphthol-6-sulfonic acid 2-氨基-8-萘酚-6-磺酸 （γ酸） [90-51-7] 100g
Amisulpride 阿米舒必利 [71675-85-9] 25g
Amphotericin B solution, sterile 溶液（2.5mg/ml） / 10ml
m-Aminophenol 3-氨基酚 [591-27-5] 25g